阪崎肠杆菌环介导等温扩增检测方法建立

• 作者: 刘欢 罗军 范宏英 龙北国 龙敏
• 来源期刊: 中国公共卫生
• 学科: 医学
• 关键词: 阪岐肠杆菌 环介导等温扩增技术 外膜蛋白(OmpA)基因 检测
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 31-33
• 分类号: TS201.3|R155.5
• 语种: 中文

摘要

目的 针对当前国内外传统检测方法缺点,建立阪崎肠杆菌快速检测法.方法 根据阪崎肠杆菌外膜蛋白(OmpA)基因,设计4条特异性引物(内、外引物各2条),建立并优化环介导等温扩增(100p-mediattA isothermalamplification,LAMP)检测体系及反应条件,并进行LAMP反应的灵敏度、特异性实验及实际样品检测.结果 LAMP检测阪崎肠杆菌,优化后的条件选择为:Mg2+浓度6 mmoVL,dNTP浓度0.6 mmoVL,甜菜碱浓度0.8 moVL,外引物与内引物的浓度比1:4,扩增温度580C 60min;细菌纯培养检测灵敏度为101cfu/mL;对11种细菌共26株菌进行LAMP扩增,仅8株阪崎肠杆菌得到阳性扩增结果,证明引物具有很高的特异性;对实际样品进行增菌检测,采用试剂盒提取DNA,从样品处理到报告结果,耗时26 h;并采用传统检测方法验证,正确性为100%.结论 该方法检测阪岐肠杆菌特异性强、灵敏度高,并且操作简便、检测成本低、耗时短,有望成为快速检测阪岐肠杆菌的有效方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	龙敏	南方医科大学公共卫生与热带医学学院微生物学系	35	142	6.0	10.0
2	范宏英	南方医科大学公共卫生与热带医学学院微生物学系	22	108	7.0	8.0
3	罗军	南方医科大学公共卫生与热带医学学院微生物学系	29	96	6.0	8.0
4	龙北国	南方医科大学公共卫生与热带医学学院微生物学系	40	154	7.0	9.0
5	刘欢	南方医科大学公共卫生与热带医学学院微生物学系	6	37	3.0	6.0