RNA干扰对子宫内膜癌HEC-1A细胞PTTG影响的研究

• 作者: 刘永利 张曙萱 袁丽萍
• 来源期刊: 中国妇幼健康研究
• 关键词: RNA干扰 垂体瘤转化基因 真核表达质粒 子宫内膜癌
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 专题研究
• 页码范围: 760-764
• 分类号: R737.33
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-5293.2011.06.015

摘要

目的 建立靶向垂体瘤转化基因(PTTG)干扰RNA质粒表达载体,观察对子宫内膜癌HEC-1A细胞PTTG的影响.方法 根据PTTG基因设计3对干扰序列,合成特异性干扰PTTG的siRNA片段,并与pSilencer3.0-Hl载体连接,构建3个PTTG干扰载体(pSilencer3.0-Hl-PTTG-siRNA),分别命名为PTTG siRNA-1、PTTG siRNA-2、PTTG siRNA-3.利用脂质体将其转染子宫内膜癌系HEC-1A细胞,以带有绿色荧光蛋白的真核表达质粒pSilencer3.0-Hl作为转染效率测定组,免疫荧光技术检测转染效率;应用RT-PCR 及Western blot分别检测PTTG mRNA和蛋白表达水平.结果 序列分析法证明构建pSilencer3.0-Hl-PTTG-siRNA质粒成功;RT-PCR和Western-blot分析表明PTTG siRNA-2在mRNA水平和蛋白水平特异性抑制PTTG基因的表达最强.结果 显示HEC-1A细胞阴性对照组荧光表达百分率约为5.3%,转染组荧光表达百分率为74.9%,瞬时转染效率约为69.6%,已经可以满足实验需要.结论 成功构建了靶向抑制PTTG基因的siRNA干扰载体,筛选了干扰效果最强的序列,为进一步实验打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁丽萍	徐州市第一人民医院妇产科	4	6	1.0	2.0
2	张曙萱	徐州市第一人民医院妇产科	14	30	3.0	4.0
3	刘永利	徐州市第一人民医院妇产科	6	35	1.0	5.0