结核分枝杆菌肝素结合血凝素与人IL12融合基因重组耻垢分枝杆菌的构建及鉴定

• 作者: 伍静 师长宏 张彩勤 张海 毛峰峰 赵勇 赵善民 郭晓雅
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: HBHA hIL-12 耻垢分枝杆菌 重组疫苗 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 961-965
• 分类号: R378.9
• 字数: 3972字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2011.11.003

摘要

目的 构建表达肝素结合血凝素与人IL12融合基因的重组耻垢分枝杆菌并对其进行鉴定.方法 通过RT-PCR从人淋巴细胞获得hIL12基因模板,采用PCR技术克隆hIL12的P40和P35两个亚基及结核分枝杆菌的HBHA基因,通过酶切鉴定及DNA测序证实连接的基因片段均正确后,构建分枝杆菌穿梭表达质粒pSMT3-HBHA-hIL12,并用电穿孔法将重组质粒转到耻垢分枝杆菌中.分别用HBHA单克隆抗体和hIL12多克隆抗体检测HBHA和hIL12蛋白在重组耻垢分枝杆菌中的表达,并测定重组耻垢分枝杆菌生长状态的改变.结果 重组耻垢分枝杆菌构建成功,通过HBHA单抗和hIL12多抗进行免疫荧光法检测证实HBHA和hIL12均有表达,并且重组的耻垢分枝杆菌的生长速度比正常组有较大的提高.结论 成功构建了表达结核分枝杆菌HBHA基因和人IL12的重组耻垢分枝杆菌,为构建一种结核病的候选疫苗提供了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	师长宏	第四军医大学实验动物中心	145	694	13.0	16.0
2	张海	第四军医大学实验动物中心	87	511	12.0	18.0
3	赵勇	第四军医大学实验动物中心	74	352	10.0	14.0
4	郭晓雅	第四军医大学西京医院呼吸内科	12	34	3.0	4.0
5	伍静	第四军医大学实验动物中心	18	133	7.0	10.0
6	毛峰峰	第四军医大学实验动物中心	27	140	7.0	11.0
7	张彩勤	第四军医大学实验动物中心	42	102	5.0	7.0
8	赵善民	第四军医大学实验动物中心	15	30	2.0	4.0