水稻T-DNA插入群体的建立及侧临序列的获得与分析

• 作者: 孙守钧 裴忠有 陈秋玲 魏进招
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: T-DNA 插入突变 转基因水稻 TAIL-PCR
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 31-36
• 分类号: S511.035.3
• 字数: 4602字
• 语种: 中文

摘要

采用农杆菌介导转化方法,将携带有GUS基因1301质粒转入日本晴水稻品种中,建立水稻T-DNA插入群体5 200个.研究表明:通过PCR和Southern Blot分析证明了再生植株为转基因植株;通过改进热不对称交错PCR(TAIL-PCR)方法,已成功地分离并测定了437个株系的侧翼序列;通过序列同源性分析表明,有147个序列只包含有载体序列,有214个序列中包含有与T-DNA右边界相邻的水稻基因组序列;通过水稻边界序列与网上水稻数据库中基因组序列比对,将3个突变体的T-DNA插入位点定位于水稻特定染色体上.