牛心肌肌钙蛋白T的提取、纯化及其单克隆抗体的制备

• 作者: 付海英 吴静 崔衢 施雨露 李一 李勇 王艳玲
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 心肌肌钙蛋白 牛 抗体,单克隆
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 诊断制品
• 页码范围: 1333-1335
• 分类号: R392-33
• 语种: 中文

摘要

目的 提取、纯化牛心肌肌钙蛋白T( Cardiac troponin T,cTnT),并制备其单克隆抗体.方法 采用组织匀浆、蛋白层析技术提取、纯化牛cTnT,紫外分光光度法检测其浓度；SDS-PAGE检测其纯度；间接ELISA法检测其反应特性.将纯化的牛cTnT免疫小鼠,进行细胞融合,间接ELSIA法筛选阳性杂交瘤细胞株,采用小鼠体内法制备腹水.结果 纯化的两批牛cTnT浓度分别为0.246和0.336 mg/ml；相对分子质量约为37 000,纯度分别为86.02％和93.77％；纯化的cTnT蛋白可与鼠抗牛cT-nT单克隆抗体结合.共获得5株分泌抗牛cTnT单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其中,阳性杂交瘤细胞株3B10腹水抗体效价达1∶10240.结论 已成功提取、纯化了牛cTnT,并建立了稳定分泌抗牛cTnT单抗的杂交瘤细胞株,为cTnT检测试剂盒的国产化奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王艳玲	吉林大学白求恩医学院	34	155	6.0	11.0
2	李一	吉林大学白求恩医学院	55	356	9.0	17.0
3	施雨露	吉林大学白求恩医学院	22	70	5.0	7.0
4	吴静	吉林大学白求恩医学院	31	124	5.0	10.0
5	付海英	吉林大学白求恩医学院	33	85	6.0	7.0
6	崔衢	吉林大学白求恩医学院	6	9	2.0	2.0
7	李勇		7	28	3.0	5.0