新型非病毒载体O-CHCS携带HBD2转染L929细胞及表达产物活性检测

• 作者: 崔南 张妮 房晓楠 李学敏 陈名懋 陈新年
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 生物学
• 关键词: 人β-防御素2 O-胆甾醇基壳聚糖(O-CHCS) 非病毒载体 生物活性 真核表达
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 709-712
• 分类号: Q782
• 字数: 2929字
• 语种: 中文

摘要

目的 研究O-胆甾醇基壳聚糖(O-CHCS)作为基因载体进行人β防御素-2(HBD2)基因转染小鼠纤维母细胞L929的可行性及检测目的 基因表达产物的生物活性.方法 构建重组质粒pCMV-hBD2,通过O-CHCS介导转染于L929细胞,提取转染细胞总RNA,用RT-PCR检测HBD2基因转录水平;收集转染细胞培养上清液,用Westernblotting检测HBD2基因蛋白的表达;用Kirby-Bauer纸片法检测HBD2抗菌活性,同时以Lipofect脂质体转染试剂作为阳性对照.结果 经过O-CHCS介导转染的L929细胞,目的 基因HBD2在转录水平和蛋白水平均有表达,转染细胞上清液对金黄色葡萄球菌有抑菌圈形成,结果同Lipofect的转染效果基本一致.结论 成功构建了真核表达载体pcMV-hBD2,证实了O-CHCS可以作为基因载体用于目的 基因HBD2的转染,且目的 基因表达产物具有生物活性,为基因工程合成HBD2提供一条经济便捷的途径.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李学敏	中国医学科学院生物医学工程研究所	7	18	3.0	4.0
2	陈新年		3	4	1.0	2.0
4	崔南		1	0	0.0	0.0
5	房晓楠		1	0	0.0	0.0
6	张妮		1	0	0.0	0.0
7	陈名懋	中国医学科学院生物医学工程研究所	1	0	0.0	0.0