人hBD2高表达易分离逆转录表达载体构建

• 作者: 张青 杜剑平 陈正堂
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: CEA信号肽 hBD-2 融合基因 克隆载体 逆转录病毒表达载体
• 年，卷（期）: 2004,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1681-1683
• 页数: 3页
• 分类号: R730.21
• 字数: 3155字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2004.11.038

摘要

目的通过现代分子生物学技术,构建人pLNCX2-CEA信号肽-EK激酶-hBD2抗菌肽逆转录表达载体,为下一步在真核细胞中高表达hBD2奠定基础.方法 PCR法将CEA信号肽、EK激酶识别位点序列、上下游酶切位点及保护性碱基克隆在一个片段上,酶切后,T4 DNA连接酶将此片段定向连接在含hBD2基因片段的pBluescript SK质粒上,经过反复构建,最终完成pLNCX2-CEA-EK-hBD2(成熟肽)融合基因及其载体,并采用逆转录病毒法将融合基因整合到宿主细胞中.结果构建到逆转录表达载体pLNCX2上的目的基因双酶切后琼脂糖电泳及测序正确,RT-PCR检测出宿主细胞融合基因表达.结论成功构建pLNCX2-CEA-EK-hBD2逆转录表达载体,并整合入宿主细胞中表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈正堂	第三军医大学新桥医院全军肿瘤中心	267	2232	19.0	35.0
2	张青	第三军医大学新桥医院全军肿瘤中心	55	616	13.0	23.0
3	杜剑平	第三军医大学新桥医院全军肿瘤中心	7	7	2.0	2.0