MicroRNA在建立DJ-1基因敲减细胞模型中的应用

• 作者: 吕瓅 杨慧 赵焕英 赵莎莎 高华 鲁玲玲
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: DJ-1 microRNA siRNA RNA干扰
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 515-519
• 分类号: R742.5
• 字数: 2736字
• 语种: 中文

摘要

目的 与传统的siRNA方法建立基因敲减模型不同,探讨合成microRNA(miRNA)在DJ-1基因敲减细胞模型中的应用.方法 构建针对DJ-1基因的合成miRNA载体,合成DJ-1基因的siRNA干扰片段.在脂质体介导下,将上述两种小干扰RNA载体或片段分别转染MN9D细胞系,应用real-time PCR和Western blot检测目的 基因DJ-1的mRNA和蛋白表达.结果 与对照组相比,转染合成microRNA的MN9D细胞中,DJ-1的mRNA水平下调90%(P<0.05),蛋白水平下调70%～85%(P<0.05);而转染siRNA的MN9D细胞中,DJ-1的mRNA水平下调50%～70%(P<0.05),蛋白水平下调20%-50%(P<0.05).结论 microRNA与siRNA均可作为基因敲减的重要研究手段.与传统的siRNA相比,合成microRNA对目的 DJ-1的干扰效率更为显著.