筛选肝细胞p53启动子结合蛋白的噬菌体表面展示技术

• 作者: 吴顺华 成军 郑玉建 钟彦伟
• 来源期刊: 环境与健康杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 噬菌体表面展示技术 p53 肝细胞
• 年，卷（期）: 2011,（7）
• 所属期刊栏目: 基础与应用
• 页码范围: 588-591
• 分类号: R994.6
• 语种: 中文

摘要

目的 筛选p53启动子结合蛋白,探讨p53对肝细胞调节的分子生物学机制.方法 应用噬菌体表面展示技术,以p53作为固相筛选分子,对噬菌体人肝细胞cDNA文库进行5轮"吸附-洗脱-扩增"过程,经噬斑的PCR扩增后,构建克隆载体,最后对所筛选克隆进行DNA测序和生物信息学分析.结果 噬菌体经5轮富集后,成功构建了噬菌体p53展示文库,该文库包含与p53结合的肝细胞蛋白有17种.其中2个克隆编码未知功能蛋白;其余的克隆分别编码人α2HS糖蛋白(AHSG)、人D4、锌指蛋白家族2(DPF2)、凋亡反应锌指基因(REQ)、Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制因子结合蛋白、氨基甲酰磷酸合成酶1、磷酸化酶激酶、酪氨酸氨基转移酶、酪蛋白激酶细胞周期素激酶、谷胱甘肽过氧化物酶、组蛋白结合蛋白3、跨膜蛋白2、血清黏蛋白2、有核红细胞白血病病毒癌基因2、毛细管扩张失调症突变基因,涉及到细胞发育和代谢、细胞外基质、细胞周期调控、信号转导、细胞凋亡以及原癌基因.结论 噬菌体表面展示技术成功筛选出了肝细胞p53启动子结合的多种类型和功能蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑玉建	新疆医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学教研室	186	1043	15.0	21.0
2	成军	北京地坛医院传染病研究所	210	843	13.0	20.0
3	钟彦伟	解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心	33	327	9.0	17.0
4	吴顺华	新疆医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学教研室	74	565	13.0	20.0