应用于双向电泳技术的不同软骨蛋白提取方案对比

• 作者: 史占军 吴志宏 尹若峰 梁锦前 肖军 邱贵兴
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 双向电泳 等电聚焦 软骨
• 年，卷（期）: 2011,（7）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 793-798
• 分类号: R319
• 字数: 3771字
• 语种: 中文

摘要

目的 探索可兼顾双向电泳凝胶图像质量和结果保真性的软骨蛋白提取方案.方法 取股骨髁软骨(n=17).分别用软骨组织直接提取总蛋白(软骨组织组)、软骨组织提取总蛋白后CPC处理(软骨+CPC组)、直接分离软骨细胞提取总蛋白(直接软骨细胞组)或培养软骨细胞提取总蛋白(培养软骨细胞组)同步进行2-DE,对比不同方案产生凝胶图像质量和结果保真性的差异.结果 软骨组织组不能形成等电聚焦.软骨+CPC组可形成等电聚焦,但蛋白点数量偏少.直接软骨细胞组可获得与培养软骨细胞组媲美的高质量等电聚焦和凝胶图像,且在高分子量和偏碱区域分离出培养软骨细胞组缺如的部分蛋白点,质谱结果显示这些蛋白分别为Ⅵ型胶原、TGF-β2和annexin等骨关节炎病因学相关蛋白.结论 从软骨组织直接提取软骨细胞用于2-DE的方案在解决等电聚焦难题的同时,还避免了细胞培养对实验结果保真性的影响,是软骨相关疾病样本的2-DE研究优化处理方案.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邱贵兴	北京协和医院骨科	66	440	12.0	18.0
2	梁锦前	北京协和医院骨科	4	24	2.0	4.0
3	吴志宏	北京协和医院骨科	14	71	5.0	8.0
4	肖军	广州南方医院关节与骨病外科	2	2	1.0	1.0
5	史占军	广州南方医院关节与骨病外科	4	24	2.0	4.0