Cyclin D1-siRNA真核质粒的构建及对HepG2肝癌细胞增殖的影响

• 作者: 张玎 王一 王岐山 王晖 连小云
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞周期素D1 RNA干扰 人肝癌HepG2细胞 细胞周期 增殖
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 6-10
• 分类号: R735.7|Q782
• 字数: 4636字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2011.05.003

摘要

目的 利用PGE-1建立针对抑制cyclinD1功能的siRNA 真核表达载体以及对肝癌HepG2细胞增殖和周期的影响.方法 针对cyclinD1 mRNA序列设计合成4对寡核苷酸,退火后连接到PGE-1质粒中,PCR及测序鉴定.用脂质体将重组质粒转染到HepG2中,RT-PCR cyclinD1 mRNA的表达,G418筛选后用RT-PCR和Westernblot技术分别检测cyclinD1 mRNA和蛋白质水平;流式细胞仪测定细胞周期的变化;MTT法测定细胞的生长.结果 在设计的4条靶序列中有一序列重组成质粒后,可明显抑制cyclinD1的表达;目的 序列表达载体转染HepG2细胞后,可以明显减少G2-M期细胞的比例,当HepG2细胞稳定转染针对cyclinD1的干扰质粒后,mRNA和蛋白质的表达也明显降低;HepG2细胞cyclinD1表达降低后,其生长也受到明显抑制.结论 成功构建针对siRNA-cyclinD1真核质粒,在体外可成功抑制人肝癌HepG2细胞的增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王一	陕西省人民医院血液科	32	87	5.0	7.0
2	张玎	陕西省人民医院血液科	26	77	5.0	7.0
3	连小云	陕西省人民医院血液科	13	39	3.0	6.0
4	王晖	陕西省人民医院血液科	77	436	10.0	18.0
5	王岐山	陕西省人民医院血液科	23	84	5.0	8.0