肠道病毒71型类病毒颗粒在昆虫细胞Sf9中的表达

• 作者: 孙茂盛 尹娜 张光明 徐婧雯 李鸿钧 谢天宏
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肠道病毒A型,人 P1基因 3CD基因 杆状病毒科 类病毒 病毒粒子
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 513-516,521
• 分类号: R373.2|Q786
• 语种: 中文

摘要

目的 构建含有肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)P1和3CD基因的嵌合型重组杆状病毒质粒,探讨3CD蛋白酶对P1蛋白的切割作用及形成类病毒颗粒(Virus-like particles,VLPs)的可能性.方法 将EV71的P1和3CD基因克隆至同一pFastBac Dual质粒上,转化感受态大肠杆菌DH10,构建重组杆状病毒质粒Bac-P1-3CD,转染昆虫细胞Sf9,制备重组杆状病毒,经SDS-PAGE、Western blot及电镜对目的 基因表达产物进行分析.结果 重组杆状病毒质粒Bac-P1-3CD经PCR鉴定证明构建正确.重组杆状病毒感染的Sf9细胞经SDS-PAGE分析,可见相对分子质量约39 000、32 000和26 000的特异条带,大小与EV71的VP1、VP0、VP3蛋白相符;Western blot分析可见与EV71 VP1蛋白大小相近的特异条带;电镜观察可见EV71类病毒颗粒.结论 EV71的P1和3CD嵌合基因可以通过重组杆状病毒在昆虫细胞中表达,3CD蛋白酶可以切割P1蛋白得到VP1抗原,并能形成类病毒颗粒.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙茂盛	中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所	46	209	8.0	10.0
2	李鸿钧	中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所	25	112	6.0	10.0
3	张光明	中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所	12	60	5.0	7.0
4	徐婧雯	中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所	2	4	2.0	2.0
5	谢天宏	中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所	8	31	3.0	5.0
6	尹娜	中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所	4	2	1.0	1.0