尼古丁抑制穿孔素/颗粒酶B诱导的A549肺癌细胞凋亡

• 作者: 刘晓光 曾芳 王晔恺 黎运呈
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 尼古丁 A549细胞 细胞凋亡 穿孔素 颗粒酶B
• 年，卷（期）: 2011,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1531-1536
• 分类号: R734.2
• 字数: 4826字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2011.08.014

摘要

目的:首次探讨尼古丁对穿孔素/颗粒酶B(perforin/granzyme B)诱导的A549肺癌细胞凋亡的抑制作用及其机制.方法:以人肺癌细胞株A549为研究对象,采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)双染荧光显微镜下观察细胞凋亡形态学变化,异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白V/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)染色后流式细胞术定量检测细胞凋亡率,RT-PCR法检测X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)及存活素(survivin)mRNA的表达量.结果:(1)不同浓度尼古丁单独作用A549细胞时未见明显诱导凋亡现象,可显著抑制细胞生长(P< 0.01),其抑制率与作用时间和剂量呈正相关.(2)0.125 mg/L perforin作用于A549细胞(1×106个)时,PI染核率可达到90%以上.而当加入1 μL granzyme B(1 mg/L)孵育6 h时,perforin/granzyme B组细胞可呈现90%以上的凋亡现象.(3)6 μmol/L尼古丁作用于perforin/granzyme B预处理的细胞6 h时可见明显凋亡抑制现象,当检测其凋亡抑制蛋白XIAP和survivin mRNA的含量时,发现尼古丁组表达量较高,perforin/granzyme B组表达量明显降低,而当尼古丁联合perforin/granzyme B时表达量最高.结论:尼古丁可明显抑制perforin/granzyme B诱导的A549肺癌细胞凋亡现象,这种作用可能与凋亡抑制蛋白XIAP和survivin的表达上调有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王晔恺	舟山医院中科院免疫基因组学联合实验室	30	110	6.0	9.0
2	曾芳	舟山医院中科院免疫基因组学联合实验室	8	8	2.0	2.0
3	刘晓光	舟山医院中科院免疫基因组学联合实验室	20	38	3.0	5.0
4	黎运呈	舟山医院传染科	6	21	2.0	4.0