马-牛无透明带卵异种克隆的研究

• 作者: 庞云渭 朱化彬 杜卫华 沈彦军 王宗礼 王栋 赵学明 郝海生 鞠光伟
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 马 牛 异种克隆 手工克隆
• 年，卷（期）: 2011,（16）
• 所属期刊栏目: 畜牧·资源昆虫
• 页码范围: 3413-3419
• 分类号: Q813|S821
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2011.16.014

摘要

[目的] 开展异种克隆,为濒危动物的保护、细胞核重编程与核质互作研究提供新途径.[方法] 以马耳成纤维细胞为供体,牛卵母细胞为受体,采用无透明带手工克隆方法构建异种胚胎,比较不同的激活液、培养液、体细胞同期方式、核移植方法对马-牛异种克隆胚胎体外发育的影响.[结果] (1) A23187+6-DMAP联合激活获得的克隆胚胎发育较好,囊胚率2.60％;(2)克隆胚胎于mCR1aa中的卵裂率和桑葚率显著高于CR1aa和SOF (83.65％vs 77.49％,74.87％; 22.36％vs19.37％,18.98％,p＜0.05),且发育到囊胚(2.72％),CR1aa与SOF间无显著差异;(3)供体细胞经血清饥饿或接触抑制处理后,获得的异种克隆胚的融合率、卵裂率、桑葚率和囊胚率无显著差异;(4)无透明带手工克隆法的融合率显著高于显微注射法(90.33％ vs 72.94％),卵裂率、桑葚率和囊胚率无显著差异;(5)马-牛异种克隆胚与牛同种克隆胚比较,融合率和卵裂率无差别,桑葚率和囊胚率有显著差异(21.78％vs63.52％; 2.71％vs37.48％).[结论] 牛卵母细胞能支持马体细胞去分化,进行核重编程.但由于二者的物种距离较远,异种克隆胚胎的发育能力远低于同种克隆胚胎.