Klotho基因启动子区域定位及活性分析

• 作者: 司良毅 宋双双 王虎林
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: klotho 基因 启动子 报告基因载体 转录活性
• 年，卷（期）: 2011,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 707-710
• 分类号: R394-33|R394.3
• 语种: 中文

摘要

目的 构建含不同长度klotho基因启动子片段的报告基因载体,研究其在不同细胞系中的转录活性.方法 以人全血基因组DNA为模板,克隆长短不同的klotho基因启动子片段,命名为klothoⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ;分别克隆入荧光素酶报告基因质粒pGL3-Basic构建真核表达载体;采用Lipofectamine 2000将重组质粒分别和pRL-TK共转染HEK293和HeLa细胞,分析不同长度的klotho基因启动子片段在细胞内的转录活性.结果 双酶切和测序鉴定均显示表达载体构建成功;klotho基因的核心启动子区域位于-504～-6;双荧光素酶活性检测显示klothoⅢ在2种细胞中的转录活性明显高于klothoⅠ、Ⅱ(P<0.05),而klothoⅣ的转录活性在HEK293细胞中能维持高水平,在HeLa细胞中显著下降(P<0.01).结论 klotho基因启动子在不同细胞中的转录活性不同,-973～-504区域可能是导致HeLa细胞中klothoⅣ转录活性下降的原因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	司良毅	第三军医大学西南医院老年病科	125	696	13.0	20.0
2	宋双双	第三军医大学西南医院老年病科	5	21	3.0	4.0
3	王虎林	第三军医大学西南医院老年病科	7	63	5.0	7.0