浅谈S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因的克隆表达与分离纯化

• 作者: 余保生
• 来源期刊: 新农民(上半月)
• 关键词: 克隆 表达 S-腺苷甲硫氨酸合成酶 亲和层析 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2011,（12）
• 页码范围: 15
• 字数: 3883字
• 语种: 中文

摘要

S-腺苷甲硫氨酸是广泛存在于生物体内的重要代谢中间物质,在体内参与DNA甲基化、蛋白质甲基化、多胺合成等众多的生物化学反应.在体内,S-腺苷甲硫氨酸合成酶催化ATP和甲硫氨酸(Met)形成S-腺苷甲硫氨酸.本文参考苏云金芽孢杆菌基因组中S-腺苷甲硫氨酸合成酶序列信息设计引物,通过PCR技术从芽孢杆菌属B.thuringiensis Dip20株菌中扩增得到SAM合成酶基因片段,插入大肠杆菌融合表达载体pGEX-6p-1构建了表达载体pGEX-SAM.将所构建的SAM合成酶表达载体pGEX-SAM转入大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α经IPTG诱导后,SDS-PAGE分析表明成功表达了SAM合成酶.进一步通过亲和层析成功的纯化了SAM合成酶.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余保生		18	60	4.0	6.0