嗜热古菌S-腺苷甲硫氨酸合成酶的序列分析、基因克隆与异源表达

• 作者: 余志良 裘娟萍 马云婷
• 来源期刊: 工业微生物
• 关键词: 嗜热古菌 S-腺苷甲硫氨酸合成酶 异源表达 序列分析
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 研究与应用
• 页码范围: 24-29
• 页数: 6页
• 字数: 3985字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2017.04.004

摘要

将Methanopyrus sp.SNP6进行功能基因组测序,获得S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因(sam)序列,并进行序列分析.将sam基因扩增后连接至表达质粒pET-28b(+),转化E.coli BL21(DE3),获得重组菌后进行诱导表达.生物信息学分析表明,sam基因编码蛋白的理论分子量为44 086.4 Da,三级结构为同源四聚体,与其他相关古菌来源的S-腺苷甲硫氨酸合成酶的蛋白序列较保守.实验结果显示,构建的重组表达质粒pET28b(+)-sam可在E.coli BL21(DE3)宿主菌中高水平表达.重组蛋白的分子量与预期值基本一致,部分为胞内可溶性表达,另一部分以包涵体形式存在.本研究首次实现了Methanopyrus sp.SNP6菌株S-腺苷甲硫氨酸合成酶的异源表达,为后期的蛋白纯化、酶学性质研究和酶促转化法生产S-腺苷甲硫氨酸奠定了理论基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	裘娟萍	浙江工业大学生物工程学院	117	1024	16.0	28.0
2	余志良	浙江工业大学生物工程学院	20	60	4.0	6.0
3	马云婷	浙江工业大学生物工程学院	1	0	0.0	0.0