影响聚式酶链式反应实验效果的基本因素

• 作者: 李学军 李立群 王小利 郑锦娟
• 来源期刊: 实验室研究与探索
• 学科: 生物学
• 关键词: 聚合酶链式反应 反应体系 琼脂糖凝胶电泳
• 年，卷（期）: 2011,（7）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 37-40,161
• 分类号: Q78
• 字数: 3871字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-7167.2011.07.010

摘要

研究聚式酶链式反应(PCR)实验中影响其扩增效果的多种因素,寻求反应体系中理想的各因素浓度配比.选取含5+10优质亚基的小麦品种为材料,以特异扩增1DX5基因PCR实验为例,从模板DNA、引物终浓度、Taq酶、二价镁离子、4dNTPs混合液、缓冲液浓度几方面入手,通过设计梯度实验,研究不同因素对PCR扩增效果的影响.结果表明,反应体系6个基本因素,缺少任何1个都扩增不出产物.在反应总体积25 μL的PCR反应体系中,模板DNA选用32 ng/μL,Mg2+终浓度2 mmol/L,Taq酶1.2 U/25μL,引物0.8μmol/lμL,4dNTPs0.3 mmol/L,缓冲液1×buffer最为合适,能扩增出理想的结果.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王小利	西北农林科技大学农学院	44	757	16.0	27.0
2	李学军	西北农林科技大学农学院	51	808	17.0	27.0
3	郑锦娟	西北农林科技大学农学院	14	116	7.0	10.0
4	李立群	西北农林科技大学农学院	27	235	11.0	14.0