稻田土壤细菌宏基因组文库构建

• 作者: 余柳青 周勇军 张建萍 段桂芳 陆永良
• 来源期刊: 江苏农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 土壤 微生物农药 RFLP-PCR分析 宏基因组文库
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 专论
• 页码范围: 18-20
• 分类号: S154.3
• 字数: 4010字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-1302.2011.02.006

摘要

为了从土壤宏基因组文库中筛选获得具有微生物农药活性的化合物及其基因簇,本研究构建了稻田土壤细菌宏基因组文库.采用直接裂解法提取土样DNA并对其纯化,之后RFLP-PCR分析土样DNA中细菌16S rDNA 基因的多样性,最后以提纯的土壤DNA为外源片段,以Fosmid载体构建了土壤宏基因组文库.提取纯化后的DNA片段大于23kb,RFLP-PCR分析土样DNA具有丰富的遗传多样性,构建获得的土样宏基因组文库约含10 000个克隆子,文库容量为3.56×10(8)bp.本研究掌握了构建土壤宏基因组文库的方法,构建的宏基因组文库可为后续的文库筛选以及获得绿色环保的微生物农药奠定了基础.