鸡新城疫病毒HN基因片段的原核表达及其单抗制备

• 作者: 余为一 王贤 陈芳芳
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 新城疫病毒 HN 原核表达 单抗
• 年，卷（期）: 2011,（20）
• 所属期刊栏目: 动物科学·饲料科学
• 页码范围: 12223-12224
• 分类号: S852.65+7
• 字数: 1836字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2011.20.095

摘要

[目的]研究NDV-HN蛋白抗原表位在动物免疫应答中的作用特点.[方法]根据HN基因和载体pGEX-4T-1的多克隆位点自行设计1对引物,以该实验室保存的重组质粒为模板,进行PCR扩增,再将其所得片段定向插入pGEX-4T-1,构建重组质粒,并对该重组质粒进行鉴定;再将构建的重组质粒在大肠杆菌中表达;最后,鉴定了相应单克隆抗体.[结果]PCR结果表明,得到了与预期结果一致的长度为850 bp的片段;重组质粒鉴定结果表明,成功构建了包含目的基因片段的重组表达质粒pGEX-4T-HN23;重组质粒经原核表达获得大小为57 kD的融合蛋白,免疫Balb/c小鼠试验表明,用免疫鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,经ELISA筛选和3次亚克隆获得2株稳定传代(可传20代以上)和分泌抗NDV-HN抗体的杂交瘤细胞株.[结论]获得的鸡新城疫病毒HN单克隆抗体,为进一步研究HN在致病过程的作用及特异性诊断提供了重要试验材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余为一	安徽农业大学动物科技学院	121	1025	17.0	25.0
2	陈芳芳	安徽农业大学动物科技学院	26	108	6.0	9.0
3	王贤	安徽农业大学动物科技学院	1	1	1.0	1.0