猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞受体Sn和CD163TaqMan荧光定量RT-PCR方法的建立

• 作者: 何玉利 刘永刚 刘鹤 武嘉男 王刚 王淑杰 石文达 董建国 蔡雪辉 韩梓峰
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 Sn受体 CD163受体 荧光定量RT-PCR
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 诊断和检测技术
• 页码范围: 297-300
• 分类号: S852.65
• 字数: 2545字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2012.04.11

摘要

为建立检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)允许细胞表面的Sn和CD163受体的方法,本研究设计针对Sn和CD163基因的特异性引物和荧光探针,建立了检测PRRSV Sn和CD163受体的荧光定量RT-PCR方法.结果显示,该方法在检测101 copies/μL～108 copies/μL模板范围内具有良好的线性关系.标准曲线的相关系数r值均大于0.996,扩增效率分别为100％和107％；该检测方法对Sn和CD163的检测下限均为10拷贝,敏感性高；批内重复试验和批间重复试验的变异系数均小于5％,具有良好的重复性.利用该方法对PRRSV感染肺泡巨噬细胞(PAM) 72 h后Sn和CD163受体mRNA的转录水平进行了检测,结果表明Sn和CD163受体的转录 水平显著上调.本研究为PRRSV病毒感染后两种主要受体变化趋势的研究提供了有效的检测方法.