人HAS3基因核心启动子区域的初步鉴定与分析

• 作者: 刘竹 刘革力 卜友泉 吉颖 宋方洲 朱江 翁华莉 艾青 谢濛宇
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 透明质酸合成酶3 启动子 转录调控
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 391-395
• 分类号: R394-33|R394.3
• 语种: 中文

摘要

目的 对人HAS3基因的核心启动子区域进行初步鉴定和分析,为深入研究HAS3基因的转录调控奠定基础.方法 以前期构建的人HAS3基因启动子荧光素酶报告基因重组体P(-761/-305)为模板,采用PCR介导的基因定点突变技术构建4个不同的系列删除体,并对HAS3启动子区域中的Sp1结合位点和核心启动子元件进行定点突变,构建相应的定点突变重组体；采用荧光素酶双报告基因分析技术检测各重组体的启动子活性.结果 构建了P( -761/-569)、P(-563/-305)、P(-490/-305)和P( -433/-305)4个系列删除体和5个定点突变体；启动子活性分析结果表明,P( -761/-569)无启动子活性,P( -563/-305)、P(- 490/- 305)和P(-433/-305)均具有较强的启动子活性,Sp1结合位点和核心启动子元件的定点突变可导致HAS3启动子活性的降低.结论 HAS3基因的核心启动子区域主要位于其转录起始位点上游附近-433 ～ -305bp内,Sp1可能在HAS3的转录调控中起重要作用.