T4噬菌体32蛋白的表达、纯化及鉴定

• 作者: 吴炳义 曾勇 胡子有
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: T4噬菌体 32蛋白 纯化 表达 pET28b BL21(DE3)
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 272-276
• 页数: 5页
• 分类号: Q7
• 字数: 3355字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2012.04.000

摘要

目的 构建T4噬菌体32蛋白的原核表达质粒T4-32-pET28b,并表达、纯化和鉴定重组目的 蛋白.方法以T4噬菌体DNA 基因组为模板,PCR扩增得到32蛋白基因片段,定向克隆到原核表达载体pET28b中,转化入大肠埃希菌BL21(DE3)中,用IPTG诱导表达目的 蛋白,然后进行镍柱纯化和G-25脱盐,获得纯化目的 蛋白,并进行核酸酶和细菌基因组污染检测及结合DNA单链能力检测.结果 构建的T4-32-pET28b质粒经酶切及测序鉴定正确,在BL21(DE3)成功表达了T4-32蛋白,经镍柱和脱盐纯化获得了高纯度的目的 蛋白.结论 成功构建了T4噬菌体32蛋白的原核表达载体T4- 32-pET28b,并实现高表达和纯化了目的 表达产物.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴炳义	南方医科大学南方医院临床医学实验研究中心	30	160	7.0	11.0
2	胡子有	南方医科大学南方医院临床医学实验研究中心	20	91	6.0	8.0
3	曾勇	南方医科大学南方医院临床医学实验研究中心	6	24	3.0	4.0