两种柱前衍生反相高效液相色谱法测定血液和尿液中游离氨基酸

• 作者: 勉强辉 孔彬 孟磊 巴吐尔 李新霞 李琳琳 毛新民 王烨 马晓丽
• 来源期刊: 氨基酸和生物资源
• 学科: 医学
• 关键词: 柱前衍生 高效液相色谱法 异硫氢酸苯酯 6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基氨基甲酸酯(AQC) 血液 尿液 游离氨基酸
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 生物技术及制品
• 页码范围: 19-24
• 页数: 6页
• 分类号: R917
• 字数: 3472字
• 语种: 中文

摘要

建立以PITC法和AQC法为柱前衍生试剂测定血液和尿液中游离氨基酸含量的测定方法.采用Waters-e2695操作系统,色谱柱为Shim-vp,ODS(250 mm×4.6 mm,5μm)(日本,岛津公司),以甲醇/乙腈/水和醋酸钠溶液(pH 6.5)为流动相,梯度洗脱.分别采用紫外和荧光检测器对血液和尿液中游离氨基酸进行含量测定.结果显示,两种衍生化方法灵敏度好、分离度高,具有良好的线性范围(r＞0.990 0),准确度高(平均回收率为75.1%～127.0%),进样精密度好(RSD为0.12%～3.42%).PITC法在尿液中游离氨基酸含量测定中显示了良好的测试准确性;而AQC法测定尿液中组氨酸、苏氨酸、脯氨酸超出线性范围,需要对尿样的前处理进行深入研究.