蜕皮甾酮对人脐带间充质干细胞冻存复苏后生物学活性的影响

• 作者: 付小兵 冯长江 吴旭 吴霞 李军 杨思明 马奎
• 来源期刊: 感染、炎症、修复
• 学科: 医学
• 关键词: 蜕皮甾酮 脐带间充质干细胞 冻存 复苏
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 18-21,封3
• 分类号: R4
• 字数: 4519字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-8521.2012.01.005

摘要

目的:研究体外条件下蜕皮甾酮(EDS)对冻存复苏后人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)生物学活性的影响.方法:hUCMSCs采用梯度冷冻技术冻存,6个月后复苏,扩增、传代,分3组培养:空白对照组用普通培养基培养；低剂量EDS组在普通培养基中加入100 μg/ml EDS;高剂量EDS组在普通培养基中加入200 μg/mlEDS.显微镜下观察细胞形态,10 d时计算克隆形成能力,绘制细胞生长0～7 d的细胞生长曲线,流式细胞仪鉴定hUCMSCs的细胞表面特异标记(CD34、CD45、CD29、CD105),油红O染色及茜素红染色观察hUCMSCs向脂肪细胞、成骨细胞分化的能力.结果:两EDS组克隆形成率约为75％,空白对照组约为40％.生长曲线显示两EDS组增殖速度较空白对照组快,但两EDS组增殖速度相近.流式检测结果显示两EDS组的CD29、CD105阳性率明显高于空白对照组,CD34、CD45呈阴性表达,其表达明显低于空白对照组(P＜0.05),两EDS组之间差异无统计学意义；成骨、成脂分化能力检测发现,各组细胞均能够向脂肪细胞、成骨细胞分化,而高剂量EDS组细胞在未加诱导培养基的情况下仍出现向成骨细胞分化的趋势.结论:在一定浓度范围内,EDS对细胞复苏后恢复细胞活性以及提高存活率方面具有积极作用,但是较高浓度的EDS有诱导细胞向成骨细胞方向分化的趋势.