稳定过表达CLN3的SY5Y细胞增殖功能加强

• 作者: 刘静 吴丹 吴白燕 杨萱 迟洪滨
• 来源期刊: 国际遗传学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: SH-SY5Y细胞 CLN3 CLN 3Δex7/8 细胞系构建 增殖
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 133-138,168
• 分类号: R329.23
• 字数: 5213字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4386.2012.03.001

摘要

目的 建立稳定表达CLN3(ceroid-lipofuscinosis,neuronal 3)和CLN3 1.02 kb缺失突变体基因(CLN3Δex7/8)的稳定细胞系,研究全长CLN3在人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞中的促增殖作用及7、8号外显子缺失突变体对细胞增殖的影响.方法 利用药物Zeocin筛选构建稳定过表达CLN3全长基因和CLN 3Δex7/8的SH-SY5Y细胞系,用RT-PCR,Real Time PCR和Western印迹检测CLN3全长及截短基因(CLN 3Δex7/8)的表达,并用Cell Counting Kit-8(CCK8)检测细胞增殖,比较两种细胞系对SH-SY5Y的增殖的影响.结果 成功构建了稳定过表达CLN3全长基因细胞系SH-SY5Y/C和CLN3Δex7/8的细胞系SH-SY5Y/Ct,mRNA水平分别过表达43倍和124倍,蛋白水平分别过表达1.5倍和20倍.过表达CLN3全长基因与空质粒对照组相比,增殖速率明显提高(P=0.044 527),差异有统计学意义,而过表达CLN 3Δex7/8的空质粒对照组相比,增殖速率无差别(P =0.345 329),差异无统计学意义.CLN3Δex7/8对细胞的增殖没有明显促增殖作用.结论 CLN3全长基因对细胞增殖具有明显促进作用,而过表达CLN 3Δex7/8对细胞的增殖没有明显影响,结果提示CLN3基因的7、8号外显子是调控细胞增殖的关键区域.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴丹	北京大学医学部基础医学院医学遗传学系	44	536	13.0	22.0
2	吴白燕	北京大学医学部基础医学院医学遗传学系	18	162	9.0	12.0
3	刘静	北京大学医学部基础医学院医学遗传学系	46	130	6.0	9.0
4	迟洪滨		12	56	5.0	7.0
5	杨萱	北京大学医学部基础医学院医学遗传学系	1	0	0.0	0.0