携带小鼠IGF-1基因的慢病毒载体构建及其在神经干细胞中的表达

• 作者: 彭长凌 朱孝荣 朱裕华 袁红花 陈仁金 陈翀
• 来源期刊: 神经解剖学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: IGF-1基因 慢病毒 神经干细胞 RT-PCR 小鼠
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 原著
• 页码范围: 485-490
• 分类号: R322.8-33
• 语种: 中文

摘要

目的:构建含有小鼠胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因的慢病毒载体,鉴定其在神经干细胞(NSCs)中的表达.方法:采用RT-PCR方法从小鼠的骨骼肌细胞中扩增IGF-1基因,克隆入pcDNA3.1质粒,构建慢病毒载体pXZ9-1GF-1.用脂质体介导三质粒共转染法转染293FT细胞,获得病毒上清.分离培养神经干细胞,Nestin免疫荧光化学鉴定.慢病毒感染神经干细胞,显微镜下观察GFP表达情况,通过RT-PCR及ELISA试剂盒分别从mRNA和蛋白水平检测IGF-1的表达.结果:通过RT-PCR法从小鼠的骨骼肌细胞中扩增出IGF-1基因并克隆入pcDNA3.1载体,经亚克隆成功构建慢病毒质粒pXZ9-IGF-1.质粒经脂质体转染293FT细胞获高滴度慢病毒颗粒,体外高效感染神经干细胞.神经干细胞经感染后,IGF-1基因mRNA和培养基中蛋白水平均高表达.结论:成功构建含小鼠IGF-1基因的慢病毒载体pXZ9- IGF-1,并在神经干细胞内获得表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁红花	徐州医学院神经生物学教研室	45	129	5.0	10.0
2	陈翀	徐州医学院血液科实验室	44	149	5.0	10.0
3	朱孝荣	徐州医学院实验动物中心	43	163	6.0	11.0
4	朱裕华	徐州医学院实验动物中心	15	55	4.0	7.0
5	彭长凌	徐州医学院实验动物中心	13	92	6.0	9.0
6	陈仁金	徐州医学院实验动物中心	11	20	3.0	4.0