人血管内皮生长因子165基因慢病毒载体的构建及其在人胚胎神经干细胞中的表达

• 作者: 张宇 敬华军 王晓斌
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 关键词: 血管内皮生长因子类 慢病毒载体 神经干细胞 转染
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 694-696
• 页数: 3页
• 字数: 2742字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2013.05.006

摘要

目的:构建携带人血管内皮生长因子165(hVEGF165)基因的慢病毒表达载体,转染人胚胎神经干细胞(hNSCs)并检测hVEGF165基因在hNSCs内的表达.方法:用RT-PCR法扩增出hVEGF165 cDNA,插入pCDH-CMV-copGFP慢病毒载体中,构建pCDH-hVEGF165慢病毒表达载体,双酶切和测序鉴定,包装并转染hNSCs.荧光显微镜观察转染细胞绿色荧光蛋白(GFP)表达,流式细胞术(FCM)测定转染率,Western blot法检测细胞中hVEGF165的表达.结果:酶切及测序结果显示成功构建pCDH-hVEGF165重组慢病毒表达载体,转染7 d后观察宿主细胞内有大量GFP表达,FCM测定转染率为63%,Western blot检测证实hVEGF165蛋白在hNSCs中过表达.结论:本实验成功构建了携带hVEGF165的慢病毒表达载体,并在hNSCs中过表达hVEGF165基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张宇	温州医学院附属第一医院神经外科	73	421	10.0	17.0
2	王晓斌	温州医学院附属第一医院神经外科	2	10	2.0	2.0
3	敬华军	温州医学院附属第一医院神经外科	2	10	2.0	2.0