人血管内皮生长因子165基因腺病毒载体的构建及其在C17.2神经干细胞的表达

• 作者: 沈庆煜 王莉梅 肖颂华 邢诒刚 陶恩祥 黎祥喷
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 血管内皮生长因子 腺病毒科 神经干细胞
• 年，卷（期）: 2005,（z1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 152-155
• 页数: 4页
• 分类号: Q5
• 字数: 3696字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-3554.2005.z1.066

摘要

[目的]构建含有人血管内皮生长因子165(VEGF165)基因的重组腺病毒载体并观察其在C17.2神经干细胞的表达,为下一步脑缺血的转基因细胞移植治疗提供基础.[方法]将VEGF165基因克隆至腺病毒穿梭质粒pAdTrackCMV,获得重组质粒pAdTrack VEGF165,经酶切线性化后,与腺病毒骨架质粒pAdEasy共同转染大肠杆菌BJ5183同源重组获得重组腺病毒质粒,将线性化的重组腺病毒质粒转染293细胞包装获得有感染能力但复制缺陷的重组腺病毒pAdCMV VEGF165,转化体外培养的C17.2神经干细胞.通过RT-PCR、原位杂交、免疫组化、Western blot法检测其在C17.2神经干细胞中的表达.[结果]重组腺病毒AdCMV VEGF165在293细胞中包装成功,病毒滴度达2×1011efu/mL.病毒上清液经ELISA检测VEGF165表达的量为(1135±138)ng/L.重组腺病毒转染神经干细胞后有稳定表达.[结论]成功构建pAd VEGF165重组腺病毒,获得了稳定表达VEGF165的神经干细胞克隆,为下一步脑缺血的转基因细胞移植治疗提供了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陶恩祥	中山大学附属第二医院神经科	68	340	10.0	14.0
2	王莉梅	中山大学附属第二医院神经科	7	20	3.0	4.0
3	肖颂华	中山大学附属第二医院神经科	55	199	7.0	9.0
4	邢诒刚	中山大学附属第二医院神经科	70	482	11.0	18.0
5	沈庆煜	中山大学附属第二医院神经科	36	169	6.0	11.0
6	黎祥喷	中山大学附属第二医院神经科	30	98	6.0	8.0