人HSP75基因重组腺病毒载体构建及在C17.2神经干细胞的表达

• 作者: 朱宁 李明星 王勇 王艳 蒋德旗 贾思远 陈庆状
• 来源期刊: 中国康复理论与实践
• 学科: 医学
• 关键词: 热休克蛋白75 重组腺病毒载体 C17.2神经干细胞
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 264-268
• 页数: 5页
• 分类号: R741
• 字数: 2944字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-9771.2015.03.005

摘要

目的：构建HSP75基因重组腺病毒载体，观察HSP75蛋白在C17.2神经干细胞中的表达。方法采用PCR方法从含人HSP75基因质粒中扩增HSP75基因，连接到腺病毒穿梭质粒的多克隆位点区域，构建重组穿梭质粒pHBAd-MCM-HSP75-GFP，在LipofiterTM转染试剂的介导下与腺病毒辅助骨架质粒pHBAd-BHGloxΔE1,3 Cre共转染HEK293细胞，整合包装成重组腺病毒， TCID50法测定病毒滴度。使用荧光显微镜、流式细胞仪和Western blotting观察重组腺病毒在C17.2细胞中的感染情况及HSP75蛋白的表达水平。结果通过酶切鉴定、测序、PCR鉴定，HSP75基因已正确插入穿梭质粒中，并与病毒骨架质粒整合包装成重组腺病毒；重组腺病毒滴度为1.0×1010 PFU/ml；Western blotting检测，转染后的神经干细胞表达HSP75蛋白。结论 HSP75重组腺病毒载体成功构建，对C17.2神经干细胞具有较高的表达效力。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王勇	南方医科大学珠江医院药剂科	48	263	8.0	13.0
2	王艳	南方医科大学珠江医院药剂科	34	185	8.0	12.0
3	李明星	南方医科大学珠江医院药剂科	4	55	3.0	4.0
4	蒋德旗	南方医科大学珠江医院药剂科	6	66	4.0	6.0
5	陈庆状	广州市中西医结合医院药剂科	4	3	1.0	1.0
6	贾思远	南方医科大学珠江医院烧伤科	9	16	2.0	3.0
7	朱宁	南海区第三人民医院药剂科	1	1	1.0	1.0