甜樱桃李矮缩病毒(PDV) RT-PCR检测方法的优化与应用

• 作者: 严雪瑞 刘庆忠 宗晓娟 徐丽 王文文 王甲威 陈立伟 魏海蓉
• 来源期刊: 中国植保导刊
• 学科: 农学
• 关键词: 甜樱桃 李矮缩病毒 RT-PCR检测 优化体系
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 10-14,9
• 分类号: S436.629
• 字数: 4850字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-6820.2012.03.002

摘要

以甜樱桃(Prunus avium L.)品种红灯的叶片为材料,提取总RNA,选用随机六聚体引物进行反转录合成cDNA,根据李矮缩病毒外壳蛋白基因设计2对特异引物,分别从感病样品中扩增出与预期片段大小相符的目的片段.通过对RT-PCR反应体系中引物、模板浓度和退火温度的优化,改进了现有的李矮缩病毒的RT-PCR检测方法,并成功用于山东泰安地区甜樱桃果园的病毒调查.另外,还可以扩增18 sRNA,实现对李矮缩病毒外壳蛋白基因表达的相对定量分析.