一种莱茵衣藻启动子功能检测系统的构建

• 作者: 孙海珊 王潮岗 胡章立 雷安平 黄惠珠
• 来源期刊: 深圳大学学报（理工版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 基因工程 T载体 莱茵衣藻 启动子功能 检测系统 珠磨法 克隆
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 534-540
• 页数: 7页
• 分类号: Q782
• 字数: 5502字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1249.2012.06534

摘要

选用莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)作为检测微藻启动子功能的生物系统,以pSP124质粒为基础,雨生红球藻β -胡萝卜素酮化酶基因bktl的启动子片段(450 base pair,记作450 bp)为间隔序列,引入两个Eam 1105 Ⅰ限制性内切酶位点,构建莱茵衣藻启动子功能检测T载体.将聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)获得的1 986 bp的bkt1启动子片段直接克隆到T载体上,通过“珠磨法”转化到莱茵衣藻CC-849中,经Zeomycin筛选获得了TranB-0.45和TranBle转基因藻,而1 986 bp的bkt1启动子无转化子,原因可能是其含有负调控元件.PCR结果显示,ble可稳定存在于转基因藻中,bkt1启动子的450bp片段具有启动子活性,能正确表达BLE蛋白.该研究表明,莱茵衣藻和pB-0.45T载体所组成的检测系统可用于藻类启动子研究,为启动子功能的研究提供了一条新途径.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡章立	深圳大学生命科学学院深圳市海洋生物资源与生态环境重点实验室	68	500	13.0	18.0
2	王潮岗	深圳大学生命科学学院深圳市海洋生物资源与生态环境重点实验室	14	78	4.0	8.0
3	雷安平	深圳大学生命科学学院深圳市海洋生物资源与生态环境重点实验室	21	218	8.0	14.0
4	黄惠珠	深圳大学生命科学学院深圳市海洋生物资源与生态环境重点实验室	1	2	1.0	1.0
5	孙海珊	深圳大学生命科学学院深圳市海洋生物资源与生态环境重点实验室	1	2	1.0	1.0