大肠杆菌酸性磷酸酶基因克隆表达及应用

• 作者: 丁庆豹 张春艳 欧伶 王玥 许彦梅 魏晓琨 黄莹
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 大肠杆菌 酸性磷酸酶 IMP
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 110-115
• 分类号: Q933
• 字数: 5009字
• 语种: 中文

摘要

将大肠杆菌K-12的酸性磷酸酶(AphA)完整基因和去信号肽基因分别克隆到pET-28a(+)栽体上,并转化入大肠杆菌BL21( DE3)中.经诱导检测,重组菌均能表达出高活性的可溶性酶蛋白,去信号肽表达更稳定.对重组菌的活性研究表明,相对于野生菌,重组菌酶活力得到大幅度提高,同时,以pNPP、肌苷为底物进行磷酸转移催化反应,在pH4.0-6.0、反应温度37℃条件下,约有30％的肌苷可转化为IMP,但随着反应的进行所形成的IMP又被该酶降解,向反应液中加入EDTA即可明显抑制酶的水解活性,减缓IMP的降解速率.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	欧伶	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	34	227	9.0	14.0
2	丁庆豹	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	27	217	10.0	14.0
3	黄莹	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	7	136	3.0	7.0
4	魏晓琨		5	13	2.0	3.0
5	许彦梅		3	3	1.0	1.0
6	张春艳		3	3	1.0	1.0
7	王玥		3	3	1.0	1.0