德国小蠊变应原Bla g 8的克隆表达及进化分析

• 作者: 张春林 龙高群
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 农学
• 关键词: 德国小蠊 变应原 序列分析 原核表达
• 年，卷（期）: 2012,（9）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 173-178
• 分类号: S961.6
• 字数: 4243字
• 语种: 中文

摘要

通过5'-RACE获得德国小蠊变应原Bla g 8基因的全长cDNA序列,进行生物信息学分析,构建原核表达栽体,诱导重组蛋白表达,建立系统进化树,为进一步研究奠定基础.通过5'-RACE技术,PCR扩增获取编码德国小蠊变应原Bla g 8蛋白的全长cDNA序列;采用生物信息学方法分析预测Bla g 8蛋白的信号肽、疏水性、跨膜区、二级结构、三级结构;建立系统进化树;构建原核表达载体pET32a-B8,IPTG诱导重组蛋白表达,并用His-tag抗体Western blotting验证.结果显示,获得编码德国小蠊变应原Bla g 8的全长cDNA序列,其完整阅读框含618个碱基,编码205个氨基酸.序列分析显示该蛋白,肌球蛋白轻链,具有EF手蛋白保守功能域.IPTG诱导获得重组蛋白.获得德国小蠊Bla g 8的完整cDNA序列,成功构建重组原核表达质粒pET32a-B8,并表达出融合蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张春林	贵阳医学院生物教研室	67	135	6.0	7.0
2	龙高群	贵阳医学院生物教研室	5	12	2.0	3.0