德国小蠊变应原Bla g2的克隆、表达及其免疫学特性鉴定

• 作者: 何毅华 刘志刚 高波
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 德国小蠊 重组变应原 IgE 基因克隆 表达纯化
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 248-251
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3251字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2007.03.010

摘要

目的 获得大量具有良好IgE结合活性的Bla g2重组变应原,以用于变态反应性疾病特异性诊断及免疫治疗的研究.方法 提取德国小蠊总RNA,采用RT-PCR的方法扩增Bla g2片段,产物连接进入pMD18-T载体.挑取重组子,用NdeⅠ和NotⅡ双酶切后将目的片段亚克隆入pET24a(+),经IPTG诱导表达后,通过Ni2+亲和层析柱对重组变应原进行纯化,并采用Western-blot检测其免疫学结合活性.结果 扩增出编码328个氨基酸的长度为984个碱基对的核苷酸片段,序列分析结果和GenBank上的基因序列(U28863)完全一致.重组变应原在E.coli BL21 star中得到高效表达,具有良好的反应原性.结论 成功构建了德国小蠊变应原Bla g2的原核表达载体,并纯化出具有免疫原特性的重组蛋白,为进一步开展Bla g2蛋白和重组疫苗研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘志刚	深圳大学过敏反应与免疫学研究所	324	1724	17.0	23.0
2	何毅华	深圳大学过敏反应与免疫学研究所	4	11	3.0	3.0
3	高波	深圳大学过敏反应与免疫学研究所	11	99	6.0	9.0