超低温冷冻对中华绒螯蟹胚胎形态结构的影响

• 作者: 侯俊利 冯广朋 刘鉴毅 庄平 张涛 章龙珍 赵峰 黄晓荣
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 中华绒螯蟹 胚胎 形态结构 超低温冷冻
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 页码范围: 1717-1724
• 分类号: S917
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1231.2012.28078

摘要

为了解超低温冷冻对胚胎形态结构的影响,以中华绒螯蟹为研究对象,运用石蜡切片、扫描电镜和透射电镜观察细胞分裂期、原肠期和原溞状幼体期胚胎,分别用玻璃化液处理和经超低温冷冻后外部形态和内部结构的变化.结果发现:(1)显微观察表明,细胞分裂期胚胎在玻璃化液中用二步平衡法处理后吸水膨胀明显,三步平衡后胚胎形态无明显变化,超低温冷冻后,卵黄物质从细胞中溢出,细胞破损严重；原肠期胚胎在玻璃化液中用二步平衡法处理后,外部形态与鲜胚无明显差异,经过冷冻后,所有胚胎内部变成粉红色,胚体由原来的透明变成不透明状,细胞膜边缘模糊似绒毛状；(2)扫描电镜观察,玻璃化液处理后的所有原肠期胚胎表面褶皱呈沟壑状,形成一层网状结构；透射电镜观察,处理后胚胎细胞内出现白色团块,细胞边缘变得粗糙有突起,细胞内冰腔清晰可见,空泡形成,80％以上线粒体解体,细胞破裂明显；(3)组织切片观察,原肠期胚胎细胞外面的膜脱落破损,胚层内有大小不一的冰腔,细胞内出现明显的空泡.原潘状幼体期胚胎经过玻璃化液处理后,外部形态与鲜胚间无明显区别,但经过超低温冷冻后,95％以上胚胎组织呈弥散状,部分卵黄物质碎裂成颗粒状,胚胎的细胞膜脱落,胚层内出现大量冰腔和空泡,90％胚胎表面皱缩凹陷,但仍有10％的胚胎表面保持光滑完整,表明原溞状幼体期胚胎是适合进行冷冻保存的时期.