重组质粒pIRESneo-EGFP-BDNF构建及转染骨髓间充质干细胞

• 作者: 宋月平 康增军 张平 苏立凯 赵钢勇 陈凯
• 来源期刊: 医学研究与教育
• 学科: 生物学
• 关键词: 脑源性神经生长因子 间充质干细胞 质粒 转染
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 7-11,43
• 分类号: Q343
• 字数: 3492字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-490X.2012.01.002

摘要

目的 探讨重组质粒pIRESneo-EGFP-BDNF构建及转染至骨髓间充质干细胞(MSCs)制备BDNF基因工程细胞的方法.方法 将pEGFP(N1)-BDNF质粒进行改造与pIRESneo相连结,构建携带BDNF的高拷贝质粒pIRESneo-EGFP-BDNF,采用电转染技术转染骨髓MSCs,经G418筛选,通过倒置荧光显微镜判断转染效率,采用Western blot方式判定转染细胞是否表达BDNF蛋白.结果 经过双酶切鉴定,pIRESneo-EGFP-BDNF携带EGFP及BDNF基因,以EGFP为报告基因,质粒构建成功；通过电穿孔技术以及G418筛选,提高pIRESneo-EGFP-BDNF转染骨髓MSCs效率.结论 成功制备高效表达携带BDNF基因的质粒,且转染骨髓MSCs,为进一步开展BDNF基因治疗神经系统变性疾病奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈凯	河北工程大学农学院	16	166	7.0	12.0
2	苏立凯	河北大学附属医院神经内科	69	335	10.0	14.0
3	赵钢勇	河北大学生物工程技术研究中心	15	121	7.0	10.0
4	宋月平	河北大学附属医院神经内科	17	88	6.0	8.0
5	张平	河北大学附属医院神经内科	34	122	7.0	9.0
6	康增军	河北大学附属医院神经内科	11	60	5.0	7.0