SV40PolyA序列及其AATAAA信号对上游GFP基因表达及转录终止的影响

• 作者: 冯晶晶 吕占军 李书平 王秀芳 王红钢
• 来源期刊: 遗传
• 学科: 生物学
• 关键词: Alu SV40 PolyA AATAAA信号 GFP 转录终止
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 113-119
• 分类号: Q78
• 字数: 4175字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1005.2012.00113

摘要

SV40 PolyA(猴空泡病毒PolyA,简称PolyA)序列是有转录终止作用和使转录的mRNA添加PolyA尾的DNA序列(240 bp),含有AATAAA六核苷酸多腺苷化信号(Polyadenylation signal).在pEGFP-C1质粒的GFP基因下游插入14个同向串联的Alu序列(Alu14),构建pAlul4质粒,瞬时转染HeLa细胞,用Northern blot检测和荧光显微镜观察GFP RNA和GFP蛋白表达,发现Alu串联序列强烈抑制GFP基因表达,该序列没有转录终止作用产生高分子量GFP融合RNA.又在pAlul4质粒GFP基因和Alu串联序列之间按正、反方向插入PolyA序列及去除AATAAA信号的PolyA序列,插入的这些PolyA序列均能部分解除Alu14对GFP基因的抑制作用；去除AATAAA信号的PolyA正、反序列仍然引起转录终止.将PolyA反序(PolyAas)分为4段每段60 bp,中间的2段分别称为2F2R和3F3R,将2F2R或3F3R插在pAlu14质粒的Alu串联序列的上游,随着插入2F2R片段拷贝数的增加转录的GFP融合RNA的分子量增加；2F2R的下游如果依然是2F2R那么2F2R可以支持转录延伸,如果2F2R下游是Alu串联序列则2F2R导致转录终止.无论插入一个3F3R或插入64个3F3R,均产生低分子量GFP RNA.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王红钢	河南大学医学院生物化学与分子生物学教研室	11	19	2.0	3.0
2	冯晶晶		1	4	1.0	1.0