RsrA-CFP融合蛋白的克隆表达及圆二色性分析

• 作者: 叶邦策 陈欢
• 来源期刊: 化学与生物工程
• 学科: 生物学
• 关键词: 天蓝色链霉菌 RsrA CFP 克隆 表达 圆二色性
• 年，卷（期）: 2012,（8）
• 所属期刊栏目: 科学研究
• 页码范围: 51-55
• 分类号: Q78
• 字数: 4319字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5425.2012.08.013

摘要

以天蓝色链霉菌M145基因组作模板,扩增σR(sigR)的anti-sigR因子基因rsrA,得到了333 bp基因；以质粒pECFP-N1作模板,扩增青色荧光蛋白基因cfp,得到了744 bp基因.将两个基因融合串联,构建rsrA/cf p/pET-28a(+)融合表达质粒.利用荧光检测技术,确定大肠杆菌BL21 (DE3)在OD600为0.5时,用1 mmol·L-1 IPTG进行诱导能大量表达融合蛋白RsrA-CFP.用镍柱亲和层析分离纯化RsrA-CFP蛋白,并用SDS-PAGE鉴定其分子量为40 kD左右.利用圆二色性初步测定RsrA-CFP蛋白的CD值,经CDNN软件分析得到:螺旋结构占32.2％、平行结构占8.0％、反向平行结构占9.3％、β折叠占16.7％、无规则卷曲占34.4％,为RsrA蛋白的功能研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	叶邦策	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	30	90	5.0	8.0
2	陈欢	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	2	7	1.0	2.0