受四环素调控的真核表达系统SK-Hep1细胞株的建立

• 作者: 彭晓慧 毛宣 汤顺清
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 医学
• 关键词: 强力霉素 转染 诱导 表达调控 SK-Hep1细胞株
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 93-96
• 分类号: R346
• 字数: 3175字
• 语种: 中文

摘要

建立稳定、高效表达外源基因的SK-Hep1细胞株,以便进一步研究基因的作用.首先将调控质粒pCDNA6/TR转染SK-Hep1细胞,经潮霉素筛选得到多个稳定单克隆.各个单克隆分别扩大培养后,转染pCDNA4/TO/lacZ质粒,再经过DOX(强力霉素)诱导表达,检测β-半乳糖苷酶(β-D galaetosidase,β-gal)活性,从而筛选出高诱导水平低背景表达的SK-Hep1 tet-on细胞株.最后,再将pCDNA4/TO/c-myc质粒转染进SK-Hep1 tet-on细胞株,进一步通过Western blotting检测该系统对下游基因的表达调控.成功建立了一株受DOX调控的高诱导水平低背景表达的细胞株SK-Hep1 tet-on 10#.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汤顺清	暨南大学生物医学工程系	55	461	12.0	19.0
2	彭晓慧	暨南大学生物医学工程系	5	5	1.0	2.0
3	毛宣	暨南大学生物医学工程系	1	1	1.0	1.0