东方田鼠部分BAC文库的微卫星筛选

• 作者: 倪丽菊 汤敏 肖君华 胡建华 高诚 高骏
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 东方田鼠 BAC文库 微卫星 菌落杂交 链霉亲和素磁珠
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 50-55
• 分类号: Q95-33
• 字数: 4000字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2012.03.011

摘要

目的 从东方田鼠的部分BAC文库中筛选微卫星.方法 应用非放射性的菌落杂交方法和磁珠富集法从东方田鼠的BAC文库中筛选高质量的微卫星标记.结果 以地高辛标记的寡聚核苷酸(CA)20为探针,通过菌落杂交法从136个东方田鼠BAC克隆中筛选出杂交信号最强的20个阳性克隆.再将这20个阳性克隆分别通过链霉亲和素磁珠法构建亚克隆文库,从中选取400个经PCR鉴定为阳性的亚克隆进一步测序分析,共得到220个微卫星序列,阳性率55％.选取重复次数高,侧翼序列完整的微卫星序列设计74对引物,共有35对引物能扩增出清晰的条带,其中16对引物具有多态性.结论 成功且高效地从阳性BAC克隆中筛选出微卫星序列,这些微卫星和阳性BAC克隆可用于后续的定位研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	肖君华		58	137	7.0	9.0
2	高骏	上海市农业科学院畜牧兽医研究所	31	77	5.0	7.0
3	汤敏		1	2	1.0	1.0