亲和层析纯化重组中性粒细胞激活蛋白

• 作者: 丁亚骏 何璐云 康巧珍 张亚娟 王亚楠
• 来源期刊: 河南医学研究
• 学科: 医学
• 关键词: 亲和层析 融合蛋白 麦芽糖结合蛋白 中性粒细胞激活蛋白
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 271-273
• 分类号: R392
• 字数: 2189字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-437X.2012.03.005

摘要

目的:直链淀粉树脂亲和层析法分离纯化重组麦芽糖结合蛋白-中性粒细胞激活蛋白(recombinant maltose-binding protein-neutrophil-activating protein,rMBP-NAP).用于支气管哮喘模型小鼠进行免疫调节实验.方法:IPTG诱导基因工程菌E.coli TB1 (pMAL-c2X-nap)表达rMBP-NAP,离心收获细胞,过柱缓冲液重悬菌体并超声破碎,再次离心取上清和沉淀,SDS-PAGE分析rMBP-NAP可溶性；直链淀粉树脂亲和层析法分离纯化rMBP-NAP;SDS-PAGE凝胶扫描分析纯化后rMBP-NAP纯度；蛋白定量试剂盒测定rMBP-NAP浓度.结果:IPTG诱导工程菌表达的rMBP-NAP主要以可溶性形式存在于超声上清中,相对分子质量约为57kD,与预期结果一致；亲和层析法纯化rMBP-NAP纯度可达96.5％,浓度可达0.625g/L.结论:用直链淀粉树脂亲和层析法,可纯化得到高纯度、高浓度的融合蛋白rMBP-NAP.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	康巧珍	郑州大学生物工程系	32	117	7.0	9.0
2	王亚楠	郑州大学生物工程系	72	63	5.0	6.0
3	张亚娟	郑州大学生物工程系	11	32	3.0	5.0
4	丁亚骏	郑州大学生物工程系	2	8	2.0	2.0
5	何璐云	郑州大学生物工程系	2	8	2.0	2.0