骨形成蛋白7干预肝纤维化小鼠肝组织E3泛素连接酶Arkadia表达的实验研究

• 作者: 宋梅 李春艳 林镯 申春燕 阳韬 陆小蒟 陈永平
• 来源期刊: 中华肝脏病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝硬化 骨形成蛋白-7 转化生子因子β1 Arkadia 模型,动物
• 年，卷（期）: 2012,（9）
• 所属期刊栏目: 肝纤维化·肝硬化
• 页码范围: 671-676
• 分类号: R512.62
• 字数: 4980字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1007-3418.2012.09.007

摘要

目的 探索E3泛素连接酶Arkadia在CCl4所致肝纤维化小鼠肝组织中的动态表达,以及骨形成蛋白7 (BMP-7)对其的阻断作用. 方法 30只健康雄性ICR小鼠,随机分为正常对照组(6只)、模型组(18只)和BMP-7干预组(6只);模型组再按不同的时间点分为4周、8周和12周3个亚组.在小鼠双后肢皮下交替注射60％ CCl4/花生油溶液(5ml/kg),每周2次,共持续12周,制备肝纤维化模型；BMP-7干预组在皮下注射CCl4的同时,从第9周开始腹腔注射BMP-7 (300Pg/g)溶液,隔天1次,共4周.苏木素-伊红(HE)和Masson染色观察肝组织病理变化;RT-PCR、免疫组织化学和Western blot法检测肝组织中Arkadia的mRNA和蛋白质表达量.样本均数比较用单因素方差分析和(或)配对t检验,方差齐时采用LSD -t检验;相关性分析用Pearson直线相关分析法. 结果 成功建立了肝纤维化小鼠模型.模型组Arkadia、Smad7和TGFβ 1的mRNA表达量在纤维化过程中逐渐升高,12周时达高峰(相对表达量分别为1.3434±0.0149、1.2200±0.0093和1.1258±0.0065),BMP-7干预组表达量降低(相对表达量分别为0.9867±0.0169、0.9517±0.0120和0.9029±0.0085),与对照组(相对表达量分别为0.5398±0.0025、0.7467±0.0072和0.6318±0.0041)相比,差异有统计学意义(F值分别为812.801、451.462和998.957,P值均＜0.01);BMP-7干预组Arkadia、Smad7和TGF β1的mRNA表达明显低于12周模型组(t值分别为12.108、18.737和16.364,P值均＜0.01).正常肝组织中Arkadia、Smad7、TGF β1蛋白仅在汇管区少量表达(相对表达量分别为2.1702±0.0518、2.0798±0.0547和2.4515±0.0487),模型组中其表达量逐渐增加(12周的相对表达量分别为3.4198±0.0279、5.4480±0.0565和5.2619±0.0530),主要在汇管区和肝细胞胞质内表达,BMP-7干预后表达量降低(分别为3.1457±0.0424、3.5616±0.0491和3.5282±0.0195),与对照组相比,差异有统计学意义(F值分别为8.399、609.690和900.561,P值均＜0.01);与12周模型组相比,BMP-7干预组Arkadia、Smad7、TGF β1的蛋白质表达量明显降低(t值分别为23.438、11.667和42.889,P值均＜0.01).结论 Arkadia在肝纤维化进展过程中呈上升趋势,BMP-7具有抗肝纤维化作用并可以抑制纤维化过程中Arkadia的表达.