肠出血性大肠杆菌效应因子z2151的E3泛素连接酶活性鉴定

• 作者: 孙超尘 李崭 李涛 王慧 陈芳红
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 基因工程 肠出血性大肠杆菌O157∶H7 泛素连接酶 体外泛素化
• 年，卷（期）: 2016,（8）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 1077-1080
• 页数: 4页
• 分类号: R378.21|Q78
• 字数: 3561字
• 语种: 中文

摘要

目的 利用基因工程方法原核表达z2151蛋白,并鉴定其E3泛素连接酶活性.方法 以肠出血性大肠杆菌O157∶H7为模板,PCR扩增目的基因,构建重组表达载体pET22b-z2151,转化BL21(DE3),诱导蛋白表达,采用镍柱亲和纯化获取目的蛋白;通过体外泛素化实验检测蛋白泛素连接酶活性.结果 亲和纯化得到较高浓度和纯度的z2151蛋白,其在体外泛素化反应中能够促使泛素小分子形成多聚泛素链,即有E3泛素连接酶活性;而且对E2泛素结合酶具有一定的选择特异性.结论 原核表达质粒pET22b-z2151构建成功,目的蛋白z2151具有泛素连接酶的体外泛素化能力,并且针对不同的E2酶亲和力不同,这些都为后续功能机制研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李涛	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	16	28	4.0	5.0
2	陈芳红	安徽医科大学军事医学科学院微生物流行病研究所	2	0	0.0	0.0
6	李崭	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	1	0	0.0	0.0
7	孙超尘	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	1	0	0.0	0.0