建立经优化的促P19鼠胚胎癌细胞神经分化模型

• 作者: 俞永平 朱丹雁 梁星光 梅宇钦 楼宜嘉
• 来源期刊: 浙江大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 胚胎性癌干细胞 神经再生 P19胚胎癌细胞 维甲酸 神经分化 表型筛选 体外模型
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 专题报道
• 页码范围: 381-385
• 分类号: R965.1
• 字数: 3348字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2012.04.005

摘要

目的:建立P19胚胎癌细胞(embryonal carcinoma cells,EC)定向分化为神经样细胞体外模型,用于快速初步确定小分子化合物促神经发生活性.方法:采用单因素变量法进行培养条件探索,考察全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,RA)浓度、悬浮天数、贴壁细胞密度和贴壁后培养液选择对分化的影响.4d后形成的拟胚体经胰蛋白酶消化为单细胞,并建立分阶段确定评价指标,适用于不同时相评价.光镜观察细胞表型,神经元特异蛋白β-tubulinⅢ免疫荧光染色加以确认.结果:P19细胞悬浮培养4d,加入RA(终浓度1μmol/L).以单细胞悬液在1.2×106/ml密度贴壁培养为最佳条件.光镜观察在第8天即有神经元样细胞表型,在第16天可形成神经元样网状结构,两个评价时间点免疫荧光染色均呈β-tubulinⅢ阳性,并与光镜表型相一致.结论:P19细胞分化为神经元样表型,为小分子促神经分化初级筛选提供模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱丹雁	浙江大学药学院心脑血管与肝脏药理研究室	20	124	5.0	10.0
2	楼宜嘉	浙江大学药学院心脑血管与肝脏药理研究室	60	567	13.0	22.0
3	梁星光	浙江大学药学院心脑血管与肝脏药理研究室	6	31	3.0	5.0
7	俞永平	浙江大学药学院药物研究所	6	17	2.0	4.0
8	梅宇钦	浙江大学药学院心脑血管与肝脏药理研究室	1	1	1.0	1.0