为明确甘肃某牛场发生的疑似犊牛支原体肺炎的病原,利用支原体培养基从2份患肺炎的犊牛肺脏病料中分离到2个分离株,分别命名为GT-01和GT-02.通过菌落形态观察、生化试验、特异性PCR鉴定和16 S rRNA测序比对对分离株进行鉴定.结果2个分离株在固体培养基上生长的菌落呈典型的“油煎蛋状”,不能水解葡萄糖、甘露醇、精氨酸,不消化酪蛋白,PCR能扩增出牛支原体特异的1 911 bp目的片段,16 S rRNA基因序列与牛支原体国际标准株PG45的同源性分别为99.4%和99.6%.结果表明,2个分离株属于牛支原体.