实时荧光PCR结合融解曲线分析快速鉴定临床常见曲霉菌

• 作者: 刘文静 史俊艳 徐英春 王瑶 王贺 郭莉娜
• 来源期刊: 中国真菌学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 实时荧光PCR 曲霉菌 融解曲线
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 330-334,338
• 页数: 6页
• 分类号: R379.6
• 字数: 4245字
• 语种: 中文

摘要

目的 采用实时荧光PCR结合融解曲线分析的方法快速将临床常见曲霉菌鉴定到种的水平.方法 ①普通PCR扩增真菌ITS区后进行序列比对,准确鉴定菌种并设计种特异性引物和探针.②采用实时荧光PCR的方法及融解曲线分析,根据不同的解链温度将5种临床常见曲霉菌鉴定到种的水平.③特异性、敏感性、重复性试验.结果 ①解链曲线分析显示,不同种曲霉菌的种特异性探针有特异的Tm值,根据Tm值的不同可以将5种曲霉菌区分开来:烟曲霉Tm =61.4℃,黄曲霉Tm=57.4℃,黑曲霉Tm=67.7℃,土曲霉Tm=55.2℃和64.5℃,构巢曲霉Tm=65.8℃.其中小孢根霉和疣状瓶霉与烟曲霉探针发生交叉反应,阴性对照不出现特异性的解链曲线.②该方法对5种曲霉菌的检测下限分别为:烟曲霉56.8 fg,黄曲霉1 110fg,黑曲霉13.7 fg,土曲霉123 fg,构巢曲霉780 fg.③重复性试验结果显示,同一种曲霉菌的Tm值波动范围不超过0.5℃.结论 采用实时荧光PCR结合融解曲线分析的方法可以快速准确地将临床常见曲霉菌鉴定到种的水平,具有良好的敏感性、特异性和可重复性,有助于临床侵袭性曲霉感染的诊断和指导抗真菌药物使用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐英春		128	2238	24.0	43.0
2	史俊艳		4	45	3.0	4.0
3	郭莉娜		11	37	4.0	5.0
4	王贺		12	45	4.0	5.0
5	王瑶		14	195	6.0	13.0
6	刘文静		3	6	2.0	2.0