鸭坦布苏病毒包膜蛋白的原核表达和间接ELISA抗体检测方法的建立

• 作者: 崔言顺 张琳 张秀美 胡北侠 郝明飞
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 鸭坦布苏病毒 包膜蛋白 原核表达 间接酶联免疫吸附试验
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 17-22
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 5032字
• 语种: 中文

摘要

为建立特异性和敏感性高的检测鸭坦布苏病毒感染的方法,采用原核表达系统对鸭坦布苏病毒(DTMUV)E基因进行了克隆与表达,SDS-PAGE电泳结果显示融合蛋白大小为54.3 ku.Western blot结果表明,经亲和层析法纯化后的重组蛋白能与DTMUV阳性血清发生特异性反应.以纯化的重组E蛋白作为包被抗原,初步建立了检测E蛋白抗体的间接ELISA方法.对ELISA各种反应条件进行了优化,确定了最适工作条件.优化后确定的抗原最适包被浓度为7 μg/mL,血清的最佳稀释度为1；320,酶标抗体最适稀释度为1:1 000.在优化条件下,阴性和阳性临界值判定标准为0.324 4.本研究建立的快速检测DT-MUV抗体的间接ELISA方法为该病的检测和流行病学调查提供了技术手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张秀美	山东省农业科学院畜牧兽医研究所山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室	111	496	11.0	17.0
2	胡北侠	山东省农业科学院畜牧兽医研究所山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室	49	275	9.0	14.0
3	崔言顺		102	601	13.0	19.0
4	张琳	山东省农业科学院畜牧兽医研究所山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室	14	39	2.0	6.0
5	郝明飞		2	23	1.0	2.0