乙型肝炎病毒X基因促TRAIL诱导Huh7细胞凋亡的机制

• 作者: 刘转转 刘雯 尤红娟 徐志辉 李向阳 汤仁仙 赵金金 郑葵阳
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒X基因 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 凋亡
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 937-941
• 页数: 5页
• 分类号: R373.2|Q78
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)X基因(HBX)促肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF related apoptosis inducing ligand,TRAIL)蛋白诱导人肝癌细胞Huh7凋亡的机制.方法 应用脂质体转染法将pcDNA3.1-HBX、pcDNA3.1分别转染Huh7细胞,建立稳定表达HBX的细胞模型Huh7-HBX和空载体对照细胞模型Huh7-3.1;运用TRAIL蛋白分别作用Huh7-HBX细胞、Huh7-3.1及Huh7细胞后,采用CCK8、流式细胞术检测细胞增殖和凋亡情况;Western blot检测死亡受体4(death receptor 4,DR4)和死亡受体5(death receptor 5,DR5)的表达情况;分光光度法检测细胞caspase8和caspase3活性.结果 RT-PCR及Western blot证实成功构建细胞株Huh7-HBX;CCK8和流式细胞术检测结果均显示Huh7-HBX细胞的凋亡率明显高于Huh7-3.1及Huh7 (P＜O.05);Western blot显示Huh7-HBX细胞的DR4、DR5的表达量明显高于Huh7-3.1及Huh7细胞(P＜0.05);caspase活性检测结果显示,Huh7-HBX细胞caspase8及easpase3的活性明显高于Huh7-3.1及Huh7 (P＜ 0.05).结论 HBX 能够通过上调Huh-7细胞表面死亡受体DR4、DR5的表达,进而促进TRAIL蛋白诱导的细胞凋亡,为进一步研究HBX的促凋亡机制提供实验依据.