高分辨熔解技术在疾病关联SNP验证检测中的应用

• 作者: 呼志斌 尤崇革 施鑫鹤 李玉民 李菲菲 郜莉娜 马克君
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 高分辨熔解 单核苷酸多态性(SNP) 基因分型 荧光染料
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 19-22
• 分类号: R394-3
• 字数: 3451字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2012.02.006

摘要

目的 探讨高分辨熔解(high resolution melting,HRM)技术的常规化检测流程以及实验设计策略和具体操作要点.方法 以疾病关联SNP单位点IL1B-31和双位点IL6-597/-572的检测为例,分别从核酸提取,引物设计、验证和有效性评价以及酶系统和HRM染料的选择与匹配等方面进行最优策略与流程的探索.结果成功建立了单位点IL1B-31和双位点IL6-597/-572的PCR-HRM检测方法并得到验证.柱提基因组DNA模板、特异高效HRM引物和应用热启动酶是PCR-HRM检测方法成功建立的关键,尤其是Beacon designer,uMelt和mfold等工具软件的应用.结论 HRM技术是一种适合疾病关联SNP验证和临床分子诊断的高通量、低成本、易操作、闭管均相检测新方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李玉民	兰州大学第二医院甘肃省消化系肿瘤重点实验室	145	523	11.0	16.0
2	郜莉娜	兰州大学第二医院检验中心	14	38	4.0	5.0
3	尤崇革	兰州大学第二医院中心实验室	36	176	7.0	11.0
7	呼志斌	兰州大学第二医院检验中心	5	10	2.0	3.0
8	施鑫鹤	兰州大学第二医院中心实验室	16	52	5.0	6.0
9	李菲菲	兰州大学第二医院中心实验室	14	70	6.0	8.0
10	马克君	兰州大学第二医院中心实验室	10	23	2.0	4.0